为什么选择 CF® 染料？

CF® 染料是一系列高度水溶性荧光染料，涵盖可见光和近红外光谱，用于标记蛋白质和核酸等生物分子。与其他市售荧光染料相比，CF® 染料由我们行业领先的化学家自行开发，可提供卓越的亮度、光稳定性和信噪比。

CF® 染料有 40 多种明亮且光稳定的荧光颜色可供选择，从蓝色到近红外。

化学创新

CF® 染料是突破性化学工程的成果，专注于提高性能，同时解决现有荧光染料长期存在的局限性。例如，磺化是 Alexa Fluor® 和 Cy® 染料等知名染料中常用的化学修饰，可减少染料聚集并增加溶解度。然而，与这些修饰相关的负电荷增加也会增加非特异性结合和背景荧光。Biotium 化学家已经解决了由聚乙二醇化 (PEG) 磺化引起的问题。这种额外的化学修饰有助于屏蔽带负电荷的磺酸盐基团，并进一步减少染料聚集并提高溶解度（图 1）。结果？荧光染料在不影响特异性的情况下提供两种化学修饰的最佳优势。

图 1. 花青染料的演变。

红色至近红外罗丹明

罗丹明染料以其出色的光稳定性和荧光量子产率而闻名。因此，几种 Alexa Fluor® 染料具有罗丹明核心结构。然而，自那以后，具有挑战性的化学阻碍了将基于罗丹明的染料的选择范围扩展到远红外和近红外 (near-IR) 区域的努力。Biotium 化学家的重大突破现在释放了罗丹明染料的潜力；通过使用苯环的咪唑取代，染料发射可以扩展到 700nm。这种新颖的修饰使我们的罗丹明染料能够获得更长的近红外发射，为多重染色提供更多染料选择，同时保持出色的光稳定性、溶解度和亮度（图 2）。例如，

图 2. 咪唑取代罗丹明染料。

图 3. CF®633 和 Alexa Fluor® 647 荧光的相对光稳定性。Jurkat 细胞用小鼠抗 CD3 抗体染色，然后用指定染料的山羊抗小鼠二抗偶联物染色。通过 Cy®5 滤光片立方体，用连续的汞弧灯激发对细胞进行成像。每 15 秒拍摄一次图像，持续 5 分钟。荧光被标准化为时间 0。

图 4. CF®633 和 CF®640R 的光稳定性比 Alexa Fluor® 647 高得多。Jurkat 细胞的染色和成像如图 3 所示。

高级近红外染料

近红外染料具有优于传统可见光染料的重要优势，因为它们具有出色的特异性、灵敏度和线性度。近红外染料对体内应用特别有用，因为在较长波长下组织穿透力更大，组织自发荧光最少。然而，近红外染料常常因染料过度聚集和溶解性差而存在亮度受限的问题。此外，许多近红外染料由于磺化而带高负电荷，导致非特异性结合和更大的免疫原性。

得益于我们新颖的 PEG 修饰，近红外 CF® 染料限制了分子内的流动性，从而在不增加过多电荷的情况下提高了量子产率和水溶性。因此，与任何其他近红外染料相比，近红外 CF® 染料更亮、更耐光，并且对体内应用具有更高的生物相容性（图 5）。此外，与使用其他商用近红外染料制备的抗体偶联物相比，使用近红外 CF® 染料标记的抗体可为蛋白质印迹和免疫染色提供更高的信噪比（图 6）。了解有关近红外 CF® 染料的更多信息。

图 5. CF®750 产生的结合物比光谱相似的染料亮得多。在不同标记程度（DOL，或每个抗体的染料数量）下，指定染料的山羊抗小鼠 IgG 偶联物的相对亮度。

图 6. CF®790 的负电荷少于 Alexa Fluor® 790，从而产生更特异的抗体偶联物。HeLa 裂解物的蛋白质印迹（两个稀释度，泳道 1 和 2）先用小鼠抗微管蛋白抗体检测，然后用指定染料的山羊抗小鼠偶联物检测。与 CF®790 相比，Alexa Fluor® 790 偶联物显示出多个非特异性条带。M：分子量标记。

无与伦比的多功能性

出色的贴标效率

用于生物偶联的活性染料通常容易水解，从而导致较低的标记效率。Alexa Fluor® 染料、DyLight® 染料和 IRDye® 等重度磺化染料特别吸湿，会加剧水解问题。相比之下，Biotium 的胺反应性 CF® 染料具有相对稳定的 SE 形式，它比许多 Alexa Fluor® 染料中发现的 SE 更耐水解。因此，CF® Dye SE产品始终具有更高的标记效率，从而为用户提供更好的价值。我们在Mix-n-Stain™ 抗体标记试剂盒中实施并简化了这项技术，无需纯化，只需 15 分钟即可使用您选择的 30 多种 CF® 染料进行快速高效的标记。此外，Mix-n-Stain™ 标记具有无与伦比的多功能性，其专利缓冲系统可耐受常见的缓冲添加剂，包括 BSA、明胶、甘油、Tris、腹水液和叠氮化物。详细了解我们的Mix-n-Stain™ 抗体标记试剂盒。

超分辨率显微镜

最近发表的比较用于超分辨率成像的合成染料的出版物表明，CF® 染料为多种方法提供了最佳性能。某些 CF® 染料表现出的卓越亮度、光稳定性和光化学转换特性是 3-D SIM、3-D STORM 和其他超分辨率和单分子成像方法的理想选择。了解有关用于超分辨率显微镜的 CF® 染料的更多信息。

多色灵活性

Biotium 目前提供超过 40 种 CF® 染料，涵盖可见光、远红光和近红外光谱，并正在开发更多颜色。CF® Dye 产品线包括活性染料、一抗和二抗、核苷酸、链霉亲和素、鬼笔环肽、凝集素和其他生物偶联物。下载CF® 染料手册以了解更多信息。