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为您的应用选择合适的染色剂
| 产品/方法 | 程序 | 好处 | 缺点 | 推荐给 |
|---|---|---|---|---|
| 使用GelRed® Prestain Plus 6X DNA Loading Dye进行 DNA 预染色 | GelRed® 加载缓冲液在加载前直接添加到 DNA 样本中 | • 快速简单：一步上样和 DNA 染色 • 染料浓度较低，操作更安全 • 可以重新运行凝胶以使用空泳道 | • 不推荐用于 PAGE、DGGE、EMSA 或 PFGE 凝胶 • 上样大量 DNA（超过 ~100 ng/条带）或某些限制性消化时，染料可能会导致条带迁移问题 | • 常规琼脂糖凝胶 • 建议加载 50-200 ng ladder 或 2-5 uL PCR 产物（~100 ng/条带或更少） |
| 使用GelRed® 10,000X 水溶液或GelGreen® 10,000X 水溶液进行预制染色 | GelRed® 或 GelGreen® 在凝胶浇铸前与熔化的琼脂糖混合 | 熟悉的协议，快速的结果 | ||
| 使用GelRed® Agarose LE或GelGreen® Agarose LE进行预制染色 | 提供的琼脂糖预涂有 GelRed® 或 GelGreen®，只需溶解、加热和倾倒 | 更安全更方便，无需处理浓缩染料 | ||
| 使用GelRed® 10,000X 水溶液或GelGreen® 10,000X 水溶液 或 – GelRed® 3X 水溶液进行电泳后染色 | 凝胶中不添加荧光染料，电泳后在 3X GelRed® 或 3X GelGreen® 溶液中染色 | • 最准确的大小/最清晰的条带 • 染色溶液可重复使用 • 通过添加 NaCl 提高灵敏度 | 电泳后额外的染色步骤（最多 30 分钟）（一些客户报告说如果染料不重复使用，仅 5 分钟后结果良好） | • 高度准确的条带大小 • 凝胶中每条带含有超过 ~100 ng DNA • 分析限制性酶切 |
| 使用PAGE GelRed® 10,000X 或 1X 水溶液对 PAGE 凝胶进行电泳后染色 | 凝胶中不添加荧光染料，电泳后在1X PAGE GelRed®溶液中染色 | • 专为聚丙烯酰胺凝胶的高效渗透和染色而 设计 • 与经典的 GelRed® 一样，安全且环保 | 大约额外的染色步骤。电泳后30分钟 | PAGE 凝胶中的核酸染色 |
您的凝胶染料有多安全？
许多溴化乙锭 (EtBr) 替代品作为安全产品在市场上销售。事实上，许多所谓的“安全”凝胶染料含有众所周知的染料，可以结合活细胞中的 DNA，具有细胞毒性作用。GelRed® 和 GelGreen® 是高度敏感的凝胶染色剂，由于不透细胞膜，因此设计为无毒和无致突变性，因此它们不能进入活细胞。下载我们的白皮书以了解更多信息。
EtBr、SYBR® Safe 和其他产品的更安全替代品
几十年来，EtBr 一直是用于核酸染色的主要染料，因为它价格低廉且通常具有足够的灵敏度。然而，EtBr 是一种高度致突变物质。与去污和废物处理相关的安全隐患和成本最终会使核酸染料的使用变得昂贵。出于这个原因，近年来，各种溴化乙锭替代 DNA 凝胶染料已在市场上销售。尽管这些可供选择的核酸染色染料在市场上以低诱变性销售，但它们通常不得不牺牲染料的其他方面。例如，SYBR® Safe 的灵敏度非常有限，而 SYBR® Green 和 SYBR® Gold 的稳定性远低于 EtBr。此外，许多所谓的“安全”DNA 染料，如 Midori Green、GreenSafe、SafeView™ 和 RedSafe™，不仅灵敏度低，但也很容易穿透活细胞与 DNA 结合，有些具有细胞毒性。看看我们的凝胶染色比较的详细信息。
GelRed® 和 GelGreen® 不容易穿透细胞。HeLa 细胞在 37°C 下与 1X SYBR® Safe、GelRed® 或 GelGreen® 孵育 30 分钟。SYBR® Safe 快速结合活细胞中的 DNA，导致亮绿色核染色。GelRed® 和 GelGreen® 无法结合活细胞中的 DNA，表现为没有荧光。
无毒、无诱变性、处置无害
为了使 GelRed® 和 GelGreen® 安全，Biotium 的科学家使用了一个新颖但非常简单的概念：通过防止染料进入活细胞来降低基因毒性。我们相信，通过拒绝其与活细胞中的基因组 DNA 接触的机会，可以使 DNA 结合染料不致突变或基本上不致突变。因此，我们设计了 GelRed® 和 GelGreen® 的化学结构，使染料无法穿过细胞膜。Ames 测试证实 GelRed® 和 GelGreen® 在远高于其用于凝胶染色的工作浓度的浓度下是非诱变性的。此外，环境安全测试表明，GelRed® 和 GelGreen® 对水生生物无害且无毒。因此，GelRed® 和 GelGreen® 可以丢弃到下水道或扔进普通垃圾桶。想要查询更多的信息，GelRed® 和 GelGreen® 安全报告。
GelGreen®、GelRed®、SYBR® Green I 和 EtBr 在 +1 移码沙门氏菌指示菌株 TA98 中的致突变性比较，其中存在 S9 组分。* 表示 EB 未在此浓度下进行测试。# 表示 SYBR Green I 在此浓度下有毒。
卓越的灵敏度和灵活的应用
GelRed® 和 GelGreen® 作为预制凝胶染色剂或凝胶后染色剂都非常敏感。GelRed® 比 EtBr 敏感得多，并且与 SYBR® Gold 不同，GelRed® 还可以用作高度敏感的预制凝胶染料。GelRed® 也可用作方便的预染上样缓冲液。GelGreen® 的光谱与 SYBR® Safe 相似，但灵敏度更高，可与 DarkReader® 等蓝光凝胶成像系统一起使用。PAGE GelRed® 专为丙烯酰胺凝胶中的 DNA 染色而设计。GelRed® 和 GelGreen® DNA 染料的另一个主要优势是它们卓越的稳定性。您可以像处理 EtBr 一样存储和处理这两种核酸染色染料。为方便起见，GelRed® 和 GelGreen® 也提供预包被的琼脂糖形式。有关使用 DNA 染色剂的详细方案，请下载GelRed® 产品信息表或GelGreen® 产品信息表。
特征
比 EtBr、SYBR® Safe 和其他产品更灵敏
用于预制或后染色
兼容下游克隆和测序
GelRed® 提供 6X 上样缓冲液形式
用于丙烯酰胺凝胶的 PAGE GelRed®
GelRed®：使用紫外透照仪和 EtBr 过滤器
GelGreen®：使用 UV 或蓝色 LED 和 SYBR® 过滤器，或我们的新型 Gel-Bright™ LED 照明器
GelRed® 优于 EtBr
溴化乙锭 (EtBr) 和 GelRed® 在预制凝胶染色中的比较，使用 TBE 缓冲液中的 1% 琼脂糖凝胶。1 kb Plus DNA Ladder (Invitrogen) 的两倍系列稀释液从左到右以 200 ng、100 ng、50 ng 和 25 ng 的量加载。使用 300 nm 透照仪对凝胶成像，并使用 EtBr 滤光片拍照。
GelGreen® 是 SYBR® Safe 无法比拟的
GelGreen® 和 SYBR Safe 在 1% 琼脂糖/TBE 凝胶电泳后染色的比较。1 kb Plus DNA Ladder (Invitrogen) 的两倍连续稀释（200 ng、100 ng、50 ng 和 25 ng）。使用 254 nm 紫外透照仪对凝胶成像，并使用 SYBR 滤光片拍照。
GelRed® 和 GelGreen® 与 DNA 的激发和发射光谱。
单击 此处 下载有关在 UVP GelDoc-It® 成像系统上使用 GelRed® 和 GelGreen® 的应用说明。
单击 此处 下载有关在带有 Visi-Blue™ 转换板的 UVP GelDoc-It® 成像系统上使用 GelGreen® 的应用说明。