VersaBlot™ Total Protein Normalization Kits
VersaBlot™ 总蛋白标准化试剂盒设计用于在 SDS-PAGE 凝胶和蛋白质印迹膜上进行灵敏、可逆和准确的蛋白质定量。注意:这些试剂盒取代了 Mix-n-Stain™ 总蛋白预染色试剂盒。
特征
用明亮的近红外 CF® 染料预标记蛋白质或裂解物
线性:比管家蛋白更好的西方标准化
可逆:允许相同的通道用于西方
灵敏:检测低至 1 ng 蛋白质
准确:检测蛋白质含量的 10% 差异
套件组件
活性 CF® 染料
DMSO,无水
WB 预染缓冲液
高灵敏度预染色缓冲液
反转缓冲器
染料逆转剂
光谱特性
CF®680T Ex/Em 681/698 nm
CF®770T Ex/Em 764/787 纳米
VersaBlot™ 概述
VersaBlot™ 总蛋白标准化试剂盒设计用于在 SDS-PAGE 凝胶和蛋白质印迹 (WB) 膜上快速灵敏地检测蛋白质。蛋白质用近红外 CF® 染料共价标记,因此在电泳后,无需凝胶染色即可通过荧光检测立即显示条带。然后可以将 SDS-PAGE 凝胶上的标记蛋白质转移到膜上进行蛋白质标准化。如果需要,可以在扫描后反转预染色,允许在同一通道中使用与近红外 CF® 染料偶联的抗体进行多色西方染色(参见下面的协议概述)。
敏感和准确的西方标准化
对于蛋白质印迹标准化,该试剂盒在宽动态范围 (0.1 – 15 ug) 的总蛋白质含量定量方面表现出出色的线性,优于蛋白质印迹检测的传统管家蛋白质标准化方法。与 Ponceau S 和 LI-COR® REVERT™ 等总蛋白染色后产品相比,VersaBlot™ 具有出色的信噪比和灵敏度(能够检测 10% 的蛋白质含量差异)的预染色方案,具有可比的可逆性和易用性。标记和逆转程序不影响蛋白质迁移率或抗体检测(包括磷蛋白和糖蛋白检测)。
SDS-PAGE凝胶上的灵敏检测
对于 SDS-PAGE 凝胶预染色,该试剂盒可以检测低至 1 ng 的低浓度蛋白质,并且具有最小的背景。与通过后染色方法观察到的未标记蛋白质相比,这些染料不会对条带的形状或流动性造成任何可见的变化。
为您的应用选择合适的染料
VersaBlot™ 总蛋白标准化试剂盒可在膜上进行多色蛋白检测,无论是否反转。CF®680T 可以使用 Typhoon™(Cy®5 或 IR Short filter)或在 700 通道中的 Odyssey® 上检测。CF®770T 可以使用 Typhoon™ IR Long 过滤器或在 800 通道中的 Odyssey® 上检测到。
对于多色成像(即没有一种颜色比其他颜色明显更亮),保持所有通道的信号强度平衡很重要。如果担心信号串扰,我们建议使用 VersaBlot™ CF®770T 总蛋白标准化试剂盒。
请参阅我们的荧光蛋白质印迹实验方案。
协议概述
CF 是 Biotium, Inc. 的注册商标。CF 染料技术受授予的美国和国际专利保护。Cy 染料是 GE Healthcare 的注册商标。Odyssey 是 LI-COR Biosciences 的注册商标。