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GloMelt™ Thermal Shift Protein Stability Kit

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用于在热位移分析中基于荧光测量蛋白质去折叠或热稳定性的试剂盒,也称为蛋白质热位移™、差示扫描荧光法或 Thermofluor 分析。
REFERENCE DYE

GloMelt™ Thermal Shift Protein Stability Kit 用于检测蛋白质去折叠或通过执行热位移测定来测量热稳定性,也称为 Protein Thermal Shift™、差示扫描荧光法或 Thermofluor 测定。

特征

  • 最适合 qPCR 仪器和 ROX 标准化的绿色荧光

  • 与高浓度洗涤剂兼容

  • 耐受较宽的 pH 范围、还原剂和常见的缓冲液/赋形剂

  • 非常适合高通量检测、低反应量和低蛋白质浓度

  • 在水性缓冲液中高度溶解和稳定

套件组件

  • GloMelt™ 染料,200X

  • 山羊 IgG 对照,10 mg/mL

  • ROX 参考染料,40 uM(仅限 33022-T/33022-1)

光谱特性

  • GloMelt™ 染料 Ex/Em 468/507 nm

  • ROX 参考染料 Ex/Em 575/600 nm

关于 GloMelt™ 热迁移蛋白稳定性试剂盒

环境敏感的荧光染料可用于监测蛋白质的温度依赖性展开。蛋白质的解链温度 (Tm) 是蛋白质热稳定性的指标。

GloMelt™ 染料在与变性蛋白质的疏水区域结合后会发生荧光增强,因此可用于检测蛋白质去折叠或通过执行热位移分析(也称为蛋白质热位移™、差示扫描荧光法或 Thermofluor 分析)来测量热稳定性。

热位移测定是一种快速且廉价的技术,可量化蛋白质变性温度的变化,因此可用于筛选影响蛋白质热稳定性的条件,例如蛋白质突变、配体结合和缓冲液配方(如 pH、盐、去垢剂)和其他添加剂)。这些测定快速(通常约 30 分钟)并在定量 PCR 系统上进行。热位移方法与高通量筛选兼容,并且比圆二色性和差示扫描量热法等方法需要更少的蛋白质。

要了解有关 GloMelt™ 的更多信息并查看它与竞争对手产品的比较,请访问我们的GloMelt™ 技术页面

热位移分析的可能用途

  • 优化缓冲液配方以提高蛋白质稳定性和储存

  • 确定突变如何影响蛋白质的稳定性

  • 快速筛选用于蛋白质结合的小分子候选药物和其他配体

溴结构域蛋白的小分子抑制剂已在癌症模型中显示出治疗效果。在此,在溴结构域抑制剂 JQ1 或 RVX-208 存在的情况下,对 10 ug 溴结构域 BRD2 进行了 GloMelt™ 热迁移测定。如熔解曲线的变化所示,抑制剂结合使蛋白质稳定。

GloMelt™ 染料与竞争对手

与 SYPRO® Orange 和 PROTEOSTAT® TS 染料等其他环境敏感染料相比,GloMelt™ 染料具有显着优势。GloMelt™ 染料会产生强信号,因为它已针对 qPCR 仪器的 SYBR® Green 通道进行检测进行了优化,因此可以使用低反应体积和低蛋白质浓度。GloMelt™ 染料与高浓度的蛋白质稳定剂(如甘油和山梨糖醇)以及蛋白质去稳定剂(如 DTT 和咪唑)兼容。与 SYPRO® Orange 不同,GloMelt™ 染料在高洗涤剂浓度下表现非常出色。另一个优点是 ROX 染料可以在热迁移分析期间与 GloMelt™ 染料一起使用,这通过增加需要 ROX 被动参考染料的 PCR 仪器的重复一致性来改善结果。

SYBR 是 Thermo Fisher Scientific 的注册商标。Proteostat 是 Enzo Life Sciences 的注册商标。

参考

  1. 188bet体育电竞(2019)8,e47172。doi:10.7554/eLife.47172

  2. PLOS ONE (2021) 16(1), e0245013。https://doi.org/10.1371/journal.pone.0245013


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