
Fura-2, AM Ester

Fura-2, AM 酯是一种与游离细胞内钙结合的比例荧光染料,是比例成像显微镜的首选染料。Fura-2, AM 酯具有膜渗透性,因此可以通过孵育加载到细胞中。由于 AM 酯的水溶性相对较低,温和的去污剂Pluronic® F-127(目录号 59004)通常用作分散剂以促进细胞负载。Fura-2, AM 酯本身不与 Ca 2+结合,但一旦进入细胞内,很容易被内源性酯酶水解为 Fura-2。
可以使用流式细胞仪、荧光显微镜或某些荧光酶标仪检测 Fura-2 荧光。在钙结合后,指示剂的荧光激发最大值从 363 nm(无 Ca 2+)蓝移至 335 nm(Ca 2+ -饱和),而荧光发射最大值在 ~510 nm 处相对不变。Fura-2 的主要用途是药物发现,用于测量 G 蛋白偶联受体 (GPCR) 和钙通道激活后的细胞内钙动员。
淡黄色固体溶于DMSO
储存于 -20°C 并避光保存,尤其是在溶液中
K d : 145 nM(22°C 在 pH 7.2 缓冲液中)(水解后)
λ Ex /λ Em (无 Ca 2+ ) = 363/512 nm;λ Ex /λ Em (高 Ca 2+ ) = 335/505 nm (水解后)
ε (363 nm, 无 Ca 2+ ) = 27,000 M -1 cm -1;ε (335 nm, 高 Ca 2+ ) = 35,000 M -1 cm -1 (水解后)
C 44 H 47 N 3 O 24
分子量:1001.9
[108964-32-5]
基于 BAPTA 的离子指示剂(如 Fura-2)已被EDC/EDAC(目录号 59002)证明可以原位固定。指示染料的固定可用于下游免疫荧光和 IHC 研究 ( Cell Calcium 1997, 21(3), 175 )。
由于指示剂不与细胞成分共价结合,因此它可以通过有机阴离子转运蛋白主动从细胞中流出。流出速率随温度增加,并且可能因细胞类型而异,导致保留时间从几分钟到几小时不等。在细胞中使用指示剂的实验通常在加载后一到两个小时内进行,但如果需要,可以重新加载具有指示剂的细胞。有机阴离子转运蛋白抑制剂丙磺舒 (#50027)可用于减缓指示剂从细胞中流出的速度。
Fura-2 产品
产品 | 单位尺寸 | 目录编号 |
---|---|---|
Fura-2,五铵盐 | 1毫克 | 50030 |
Fura-2,五钾盐 | 1毫克 | 50031 |
Fura-2,五钠盐 | 1毫克 | 50032 |
Fura-2, AM 酯 | 10 x 100 微克 | 50033 |
20 x 50 微克 | 50033-1 | |
1毫克 | 50034 | |
Fura-2,AM 酯,1 mM 溶液 | 1毫升 | 50029 |
Pluronic 是巴斯夫的注册商标。
参考
Am J Physiol 263, 1292 (1992), DOI: 10.1152/ajpheart.1992.263.4.H1292
J Mol Cell Cardiol 24, 937 (1992), DOI: 10.1016/0022-2828(92)91861-X
方法 Cell Biol, 99, 113, (2021), DOI: 10.1016/B978-0-12-374841-6.00005-0





