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Dual Apoptosis Assay with NucView® 488 Caspase-3 Substrate & Annexin V

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这些试剂盒提供两种细胞凋亡标记物,即我们的新型 NucView® 488 Caspase-3 底物和膜联蛋白 V 结合物,用于检测 caspase-3 激活和磷脂酰丝氨酸 (PS) 易位。
CONJUGATION

这些试剂盒提供两种细胞凋亡标记物,即我们的新型 NucView® 488 Caspase-3 底物和荧光 CF® 染料 Annexin V,用于检测两个重要的细胞凋亡事件,caspase-3 激活和磷脂酰丝氨酸 (PS) 易位。

特征

  • 检测半胱天冬酶活性和磷脂酰丝氨酸暴露

  • 快速,15-30 分钟染色

  • 用于流式细胞术或荧光显微镜

  • 甲醛固定

  • 选择红色或远红色荧光 Annexin V

  • 采用明亮且耐光的 CF® 染料

套件组件

  • NucView® 488 Caspase-3 底物,0.2 mM 溶于 DMSO

  • Annexin V 偶联物的选择(人类、重组、大肠杆菌生产)

  • 5X 膜联蛋白结合缓冲液

  • Ac-DEVD-CHO Caspase-3 抑制剂,2 mM 溶于 DMSO

光谱特性

  • NucView® 488:Ex/Em 500/530 nm(切割后,含 DNA)

  • Texas Red® Annexin V:Ex/Em 594/615 nm

  • CF®594 膜联蛋白 V:Ex/Em 593/614 nm

  • CF®640R 膜联蛋白 V:Ex/Em 642/662 nm

即使在同一群体中,细胞凋亡率也因细胞而异。因此,伴随细胞凋亡过程的各种细胞凋亡事件或标志物在细胞之间也不同地发生。因此,重要的是能够在单个细胞的基础上检测这些细胞凋亡事件。传统上,使用膜不可渗透的荧光酶底物(如 DEVD-R110)或荧光标记的抑制剂(如 FLICA 试剂)检测半胱天冬酶活性。在前一种情况下,需要细胞裂解,因此无法检测活细胞中的半胱天冬酶活性。此外,此类 caspase 测定仅测量给定时间高度异质性细胞群的平均 caspase 活性。在后一种情况下,尽管 FLICA 试剂可以进入活细胞以检测 caspase 活性,

与传统的 caspase 检测不同,NucView® 488 Caspase-3 底物以无干扰的方式检测单个全细胞内的 caspase-3 活性。底物由荧光 DNA 染料和 caspase-3 特异的 DEVD 底物部分组成。底物既不发荧光又不具有 DNA 染料的功能,它迅速穿过细胞膜进入细胞质,在那里它被 caspase-3 裂解形成高亲和力的 DNA 染料,将细胞核染成鲜绿色。因此,NucView® 488 caspase-3 底物具有双功能,可以检测 caspase-3 活性并可视化凋亡细胞核形态。

该试剂盒包含足以进行 50 次流式细胞术测定(200 uL 测定体积)的试剂。可以使用该试剂盒进行的荧光显微镜检测的次数可能会根据所用培养容器的大小和染色体积而有所不同。

要了解使用 NucView® caspase-3 底物监测细胞凋亡的优势,请访问 NucView® 技术页面

NucView 是 Biotium 的注册商标。NucView 酶底物技术受美国专利保护。Texas Red 是 Thermo Fisher Scientific 的注册商标。

参考

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5. 生药学研究 (2010) 2(2), 113-119。doi: 10.4103/0974-8490.62949
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12. 当前癌症药物目标 (2018) 18, 1-9。DOI:10.2174/1568009617666171114144236
13. Sci Rep (2018) 8, 13192. DOI:10.1038/s41598-018-31575-3

在支持文档下找到 NucView® 参考文献列表和经过验证的细胞系列表。