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膜和细胞表面染色比较
为您的应用找到合适的染料

为您的工作流程寻找膜或表面染色
研究人员经常希望标记细胞表面或质膜,以在多色荧光成像中可视化细胞边界或细胞形态。Biotium 提供多种传统和新颖的染色剂,专为方便地标记活细胞、固定细胞或活细胞或用于固定和后续免疫染色而设计。请参阅下文,为您的应用找到合适的染色剂。另请下载我们的膜和细胞表面染色手册


A. 活细胞染色

1. 染色活细胞

2.洗1

3. 图像活细胞2


Recommended products:

CellBrite® Cytoplasmic Membrane Dyes
CellBrite® Steady Membrane Stains

1共聚焦成像时,CellBrite® Steady Stains 的洗涤是可选的。

2 CellBrite® 细胞质膜染料对细胞进行稳定染色以进行跟踪实验,但会迅速内化。CellBrite® Steady Kits 可用于培养数天的细胞表面成像。


B. 先染色再固定

1. 染色活细胞

2.修复细胞

3.(可选)进行
额外染色



Recommended products:
CellBrite® Cytoplasmic Membrane Dyes3
CellBrite® Fix Membrane Stains
MemBrite® Fix Membrane Stains
WGA Conjugates
ConA Conjugates

3推荐用于 CellBrite® 细胞质膜染料的甲醛固定。


C. 染色、固定和透化

1. 染色活细胞

2.修复细胞

3. 透化细胞

4.(可选)进行
额外染色

Recommended products:
CellBrite® Fix Membrane Stains
MemBrite® Fix Membrane Stains
WGA Conjugates
ConA Conjugates

  

D. 固定,然后染色

1.修复细胞

2. 染色细胞


Recommended products:
CellBrite® Cytoplasmic Membrane Dyes3
WGA Conjugates
ConA Conjugates

3推荐用于 CellBrite® 细胞质膜染料的甲醛固定。


比较膜和细胞表面染色

Stain

Dye transfer
between cells

Non-toxic, stable1

Stains
yeast

Stains
bacteria

Stain after fixing2

Fix after
staining

Tolerates detergent /
MeOH fix?

Color
selection

Pros & Cons

CellBrite® Steady
Membrane Staining Kits

是的

是的

5 种颜色
(蓝色至近红外)

优点:对活细胞表面进行数天的成像
优点:增强剂会掩盖细胞内染色
优点:在培养基中染色快速、均匀 缺点
:不耐受固定

CellBrite® Cytoplasmic
Membrane Dyes

最小

是的

3

3

4 种颜色
(蓝色到远红色)

优点:在染色之前或之后修复3
缺点:活细胞染色不均匀
缺点:对 MeOH/洗涤剂的耐受性较差

CellBrite® NIR
Near-Infrared Cytoplasmic Membrane Dyes

最小

是的

是的

是的

4 种近红外
染料颜色

CellBrite® Fix
Membrane Stains

最小

是的

是的

是的

是的

是的

绿色、
红色和
远红

优点:快速、均匀的染色
优点:染色后清洗(可选)
优点:固定和烫发细胞以用于 IF
优点:对酵母和细菌进行染色
缺点:无法对固定细胞进行染色

MemBrite® Fix
Cell Surface Staining Kits

最小

是的

是的


仅克+

是的

是的

8 种颜色
(蓝色至近红外)

优点:快速、均匀的染色
优点:为 IF 固定和烫发细胞
优点:出色的颜色选择
优点:对酵母进行染色
缺点:无法对固定细胞进行染色

CF® Dye
WGA Conjugates

可能的

可能有毒4

温柔的疤痕

荧光
革兰氏染色

是的

是的

是的

13 种颜色
(紫外到近红外)

优点:在染色之前或之后修复
优点:荧光革兰氏染色
优点:酵母芽疤痕染色
优点:很好的颜色选择
缺点:可能因细胞类型而异

CF® Dye
Con A Conjugates

可能的

可能有毒4

是的

据报告可
染色生物膜

是的

是的

是的

10 种颜色
(紫外到近红外)

优点:在染色之前或之后修复
优点:很好的颜色选择
优点:染色酵母
缺点:可能因细胞类型而异



活的 MCF7 细胞在完全培养基中用 CellBrite® Steady 650 plus Enhancer 染色 48 小时,并在没有洗涤步骤的情况下通过共聚焦显微镜成像。

HeLa 细胞用甲醛固定,然后用 CellBrite® Blue Cytoplasmic Membrane Staining Kit 染色,清洗,并通过共聚焦显微镜成像。

HeLa 细胞用 CellBrite® Fix 555(红色)染色,然后用 MeOH 固定并用 CF®640R 线粒体标记单克隆抗体克隆 113-1(青色)和 NucSpot® 470(绿色)染色。

酿酒酵母分别用 MemBrite® Fix 488/515(绿色)、MemBrite® Fix 568/580(红色)和 MemBrite® Fix 640/660(品红色)染色,然后在成像前混合在一起。

活的 HeLa 细胞在 37°C 的 HBSS 中用 CF®594 Concanavalin A(Con A,红色)和 Hoechst 33342(蓝色)染色 10 分钟,然后清洗并通过共聚焦显微镜成像。

MemBrite® Fix 比传统的膜染色更均匀地标记细胞,并且耐受透化作用。HeLa 细胞用 DiI 或 MemBrite® Fix 568/580 标记,然后用甲醛固定/透化,然后用 Triton® X-100,或用甲醇固定。与 DiI 不同,MemBrite® Fix 标记是共价标记,因此它不会在透化后重新分布或洗掉。

MemBrite® Fix 试剂盒提供多种染料颜色选择,对 PFA 和甲醇等常见固定剂具有出色的耐受性。细胞在 37°C 下用指定的染料标记 5 分钟,然后在 -20°C 下用冰冷的甲醇固定 5 分钟。

染色整个生物体的细胞表面

MemBrite® Fix 染料已被用于标记整个生物体的细胞表面。下图由 CRBM(Centre de Recherche en Biologie cellulaire de Montepellier)的 Patrick Lemaire 实验室提供,MemBrite® Fix 543/560 用于染色被囊类动物Phallusia mammillata 的整个胚胎,然后进行下游杂交链式反应荧光原位杂交( HCR-FISH)用于检测 RNA 转录本。从动物半球到胚胎的植物半球的整个 Z 堆栈都清楚地标记了细胞边界。

被囊动物Phallusia mammillata的胚胎在第 12 阶段使用 MemBrite® Fix 543/560(红色)染色:原肠胚中期,然后是下游 HCR-FISH。胚胎用 DAPI(蓝色)固定,并使用共聚焦显微镜成像。左:平面穿过胚胎的动物半球。中心:胚胎的中心。右图:用 FISH 标记的 RNA 转录本(绿色)穿过胚胎的植物半球。比例尺为 100 um。图片来源:Ingrid Mormin,Patrick Lemaire 实验室研究助理,CRBM-CNRS UMR5237。

被囊动物Phallusia mammillata的胚胎在第 12 阶段用 MemBrite® Fix 543/560(红色)染色:原肠胚中期并用 DAPI(蓝色)固定。图像通过 z 堆栈从动物半球进展到胚胎的植物半球。图片来源:Ingrid Mormin,Patrick Lemaire 实验室研究助理,CRBM-CNRS UMR5237。