为您的工作流程寻找膜或表面染色
研究人员经常希望标记细胞表面或质膜,以在多色荧光成像中可视化细胞边界或细胞形态。Biotium 提供多种传统和新颖的染色剂,专为方便地标记活细胞、固定细胞或活细胞或用于固定和后续免疫染色而设计。请参阅下文,为您的应用找到合适的染色剂。另请下载我们的膜和细胞表面染色手册。
A. 活细胞染色
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Recommended products:
CellBrite® Cytoplasmic Membrane Dyes
CellBrite® Steady Membrane Stains
1共聚焦成像时,CellBrite® Steady Stains 的洗涤是可选的。
2 CellBrite® 细胞质膜染料对细胞进行稳定染色以进行跟踪实验,但会迅速内化。CellBrite® Steady Kits 可用于培养数天的细胞表面成像。
B. 先染色再固定
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Recommended products:
CellBrite® Cytoplasmic Membrane Dyes3
CellBrite® Fix Membrane Stains
MemBrite® Fix Membrane Stains
WGA Conjugates
ConA Conjugates
3推荐用于 CellBrite® 细胞质膜染料的甲醛固定。
C. 染色、固定和透化
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Recommended products:
CellBrite® Fix Membrane Stains
MemBrite® Fix Membrane Stains
WGA Conjugates
ConA Conjugates
D. 固定,然后染色
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CellBrite® Cytoplasmic Membrane Dyes3
WGA Conjugates
ConA Conjugates
3推荐用于 CellBrite® 细胞质膜染料的甲醛固定。
比较膜和细胞表面染色
Stain | Dye transfer | Non-toxic, stable1 | Stains | Stains | Stain after fixing2 | Fix after | Tolerates detergent / | Color | Pros & Cons |
是的 | 是的 | 不 | 不 | 不 | 不 | 不 | 5 种颜色 | 优点:对活细胞表面进行数天的成像 | |
最小 | 是的 | 不 | 不 | 是3 | 是3 | 不 | 4 种颜色 | 优点:在染色之前或之后修复3 | |
最小 | 是的 | 不 | 不 | 是的 | 是的 | 不 | 4 种近红外 | ||
最小 | 是的 | 是的 | 是的 | 不 | 是的 | 是的 | 绿色、 | 优点:快速、均匀的染色 | |
最小 | 是的 | 是的 |
| 不 | 是的 | 是的 | 8 种颜色 | 优点:快速、均匀的染色 | |
可能的 | 可能有毒4 | 温柔的疤痕 | 荧光 | 是的 | 是的 | 是的 | 13 种颜色 | 优点:在染色之前或之后修复 | |
可能的 | 可能有毒4 | 是的 | 据报告可 | 是的 | 是的 | 是的 | 10 种颜色 | 优点:在染色之前或之后修复 |
活的 MCF7 细胞在完全培养基中用 CellBrite® Steady 650 plus Enhancer 染色 48 小时,并在没有洗涤步骤的情况下通过共聚焦显微镜成像。
HeLa 细胞用甲醛固定,然后用 CellBrite® Blue Cytoplasmic Membrane Staining Kit 染色,清洗,并通过共聚焦显微镜成像。
HeLa 细胞用 CellBrite® Fix 555(红色)染色,然后用 MeOH 固定并用 CF®640R 线粒体标记单克隆抗体克隆 113-1(青色)和 NucSpot® 470(绿色)染色。
酿酒酵母分别用 MemBrite® Fix 488/515(绿色)、MemBrite® Fix 568/580(红色)和 MemBrite® Fix 640/660(品红色)染色,然后在成像前混合在一起。
活的 HeLa 细胞在 37°C 的 HBSS 中用 CF®594 Concanavalin A(Con A,红色)和 Hoechst 33342(蓝色)染色 10 分钟,然后清洗并通过共聚焦显微镜成像。
MemBrite® Fix 比传统的膜染色更均匀地标记细胞,并且耐受透化作用。HeLa 细胞用 DiI 或 MemBrite® Fix 568/580 标记,然后用甲醛固定/透化,然后用 Triton® X-100,或用甲醇固定。与 DiI 不同,MemBrite® Fix 标记是共价标记,因此它不会在透化后重新分布或洗掉。
MemBrite® Fix 试剂盒提供多种染料颜色选择,对 PFA 和甲醇等常见固定剂具有出色的耐受性。细胞在 37°C 下用指定的染料标记 5 分钟,然后在 -20°C 下用冰冷的甲醇固定 5 分钟。
染色整个生物体的细胞表面
MemBrite® Fix 染料已被用于标记整个生物体的细胞表面。下图由 CRBM(Centre de Recherche en Biologie cellulaire de Montepellier)的 Patrick Lemaire 实验室提供,MemBrite® Fix 543/560 用于染色被囊类动物Phallusia mammillata 的整个胚胎,然后进行下游杂交链式反应荧光原位杂交( HCR-FISH)用于检测 RNA 转录本。从动物半球到胚胎的植物半球的整个 Z 堆栈都清楚地标记了细胞边界。
被囊动物Phallusia mammillata的胚胎在第 12 阶段使用 MemBrite® Fix 543/560(红色)染色:原肠胚中期,然后是下游 HCR-FISH。胚胎用 DAPI(蓝色)固定,并使用共聚焦显微镜成像。左:平面穿过胚胎的动物半球。中心:胚胎的中心。右图:用 FISH 标记的 RNA 转录本(绿色)穿过胚胎的植物半球。比例尺为 100 um。图片来源:Ingrid Mormin,Patrick Lemaire 实验室研究助理,CRBM-CNRS UMR5237。
被囊动物Phallusia mammillata的胚胎在第 12 阶段用 MemBrite® Fix 543/560(红色)染色:原肠胚中期并用 DAPI(蓝色)固定。图像通过 z 堆栈从动物半球进展到胚胎的植物半球。图片来源:Ingrid Mormin,Patrick Lemaire 实验室研究助理,CRBM-CNRS UMR5237。