CellBrite® Fix 染料是独特的荧光膜染料，可对活细胞中的质膜进行共价染色，并且可以承受固定和去污剂透化。

• 唯一能够经受固定和透化的膜染料

• 15 分钟内明亮、均匀的细胞表面染色

• 提供绿色、红色和远红色荧光

• CellBrite® Fix 488 经验证可通过 SIM 对外泌体进行超分辨率成像（参考文献 1）

• 每个小瓶可制备 20 uL 1000X 染料

独特的可固定膜染色剂

CellBrite® Fix 染料是 Biotium 开发的一系列专有荧光团，用于快速染色活细胞的外质膜。它们在膜染色剂中是独一无二的，因为它们的表面染色可以承受透化和甲醇固定，允许质膜染色与细胞内抗体染色相结合。其他膜染料，如 DiO、DiI、Vybrant® 膜染料、CellMask™、CellVue® 或 PKH 染料可以用甲醛固定。但它们与去污剂透化或甲醇固定不兼容，因为这些处理会从膜中提取亲脂性染料。与 WGA 等凝集素结合可能因细胞类型而异的特定靶标不同，CellBrite® Fix 染料是一般的膜染料。

CellBrite® Fix 染料具有胺反应性，可在细胞膜上积聚，并与膜蛋白共价结合。因此，在透化或甲醇固定后，表面染色得到很好的保留，与单独的甲醛固定相比，细胞内荧光仅略有增加。CellBrite® Fix 染料在水性介质中仅发出微弱的荧光，但在膜染色后会发出强烈的荧光。染料的这种荧光特性使得染色非常特异，背景低。与 DiO 和 DiI 等亲脂性羰花青染料相比，CellBrite® Fix 染料具有更好的水溶性，因此染色效果更加均匀。染料无细胞毒性，不易在细胞间转移。

CellBrite® Fix 染料还可用于染色酵母和细菌（革兰氏阳性或革兰氏阴性）。有关我们的染料如何染色各种生物体的更多信息，请参阅我们的 细胞染色表 。

CellBrite® Fix Membrane Stains 以冻干形式提供。包括一瓶无水 DMSO 用于染料复溶。复溶后，每个小瓶可产生 20 uL 1000X 染料（下载产品方案了解更多信息）。这些染料有绿色、红色和远红色荧光。我们还提供MemBrite® Fix Cell 表面染色试剂盒。有多种染料颜色可供选择，包括超分辨率兼容选项。有关详细信息，请参阅常见问题。

成功秘诀

请注意，CellBrite® Fix 染料对死细胞的染色比对活细胞的染色更强烈。有关使用 CellBrite® Fix 进行染色和成像（第 5 步）的提示，请参阅我们的技术提示：成功使用膜和表面染色的五个步骤。

为您的应用找到合适的染色剂

固定前必须使用 CellBrite® Fix 染料对活细胞进行染色。它们不能用于染色已经固定的细胞（染料主要标记固定细胞中的细胞内膜）。我们原创的CellBrite® 细胞质膜染料可用于在固定和透化后对细胞进行染色，请参阅我们的技术提示：将亲脂性膜染料与免疫荧光相结合。要为您的应用找到合适的染色剂，请参阅我们的膜和细胞表面染色剂比较，或下载我们的膜和表面染色剂手册。

CellBrite® Fix 染料设计用于在染色后立即固定。随着染料孵育时间的延长，或者如果细胞在染色后培养，染料将被内吞作用内化，导致细胞内囊泡被标记。染色后 24 小时，大部分染料将位于细胞内部，而不是细胞表面。为了长期观察培养中的细胞边界，我们推荐使用我们的CellBrite® Steady Membrane Staining Kits。这些试剂盒包括独特的荧光膜探针，可在活细胞培养物中保留细胞表面染色 24 小时或更长时间。该试剂盒还包括一个可选的 CellBrite® Steady Enhancer 解决方案，该解决方案可以掩盖细胞内信号，从而提高细胞边界的特异性。

据报道，CellBrite® Fix 488 可以染色外泌体，以通过 SIM 进行超分辨率成像（参考文献 1；参见突出显示的引文）。然而，我们发现 CellBrite® Fix 染料不能有效地染色分离的外泌体，相反我们建议使用我们的ExoBrite™ EV 膜染色试剂盒对外泌体进行膜染色。查看我们推荐的所有用于外泌体和 EV 标记的染色剂。

注意： CellBrite® Fix 染料带有总的净正电荷。我们有客户报告说它们可能对神经细胞上的机械转导或其他阳离子通道具有渗透性，类似于 FM®1-43 等阳离子苯乙烯基染料（参见J Neurosci (2013) 23(10), 4054），导致显着细胞内积聚或染色。我们的 MemBrite® Fix 染料不带正电荷，因此不应该有这个问题。

CellBrite® Fix 订购信息

注意：由于 CellBrite® Fix 染色是共价的，因此荧光团保留在细胞膜的外叶上，这与传统的膜染料不同，例如 DiO 和 DiI，已知它们在染色过程中会发生触发器跨膜运动。因此，CellBrite® Fix 染料与猝灭染料结合使用时，可能特别适用于膜电位检测，猝灭染料在膜中的分配取决于膜电位，类似于用于此目的的DiO/DPA系统（参见J Neurosci (2009) 29 (29), 9197 )。我们欢迎任何有兴趣与 Biotium 合作验证 CellBrite® Fix 染料的应用的合作者通过techsupport@biotium.com与我们联系。