NucView® Caspase-3 Enzyme Substrates

荧光 caspase-3/7 底物，用于通过共聚焦显微镜、流式细胞术或活细胞成像检测完整细胞中的细胞凋亡。

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产品属性

常见问题

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NucView® Caspase-3 Substrate 是一种方便的工具，可使用共聚焦显微镜、流式细胞术或活细胞成像基于 caspase-3/7 活性检测完整细胞中的细胞凋亡。

快速、免洗、终点或实时检测
无毒，可进行多天实验
提供绿色、蓝色或橙色荧光
用于流式细胞术、显微镜或活细胞成像系统
半胱天冬酶活性和核形态的双重检测
甲醛可固定

关于 NucView®

NucView® 底物由与 caspase-3/7 DEVD 识别序列偶联的荧光 DNA 染料组成。最初是非荧光的底物穿透质膜并进入细胞质。在凋亡细胞中，caspase-3/7 切割底物，释放高亲和力 DNA 染料，该染料迁移到细胞核并用荧光染色 DNA。因此，NucView caspase-3 底物是双功能的，允许检测 caspase-3/7 活性并可视化细胞凋亡期间细胞核的形态变化。

与其他荧光 caspase 底物或基于荧光 caspase 抑制剂 (FLICA) 的检测相比，NucView® caspase-3 底物可用于检测单个完整细胞内的 caspase-3/7 活性，而不会抑制细胞凋亡进程。染色与随后的免疫染色固定和透化兼容。

NucView® 底物以 DMSO 或磷酸盐缓冲盐水 (PBS) 溶液的形式提供。PBS 中的底物经过配制，可用于对 DMSO 毒性敏感的细胞。在对 DMSO 不敏感的细胞类型中，在底物孵育期间添加 DMSO 可能会增强 NucView® 染色。

NucView® Caspase-3 底物和试剂盒	目录号	特征
NucView® 405 Caspase-3 底物，1 mM DMSO	10405	在 Pacific Blue® 通道中用于流式细胞仪的蓝色荧光或使用 405 nm 激光进行显微镜检查
NucView® 405 Caspase-3 底物，1 mM PBS 溶液	10407	PBS 中的 NucView® 405 底物，用于 DMSO 敏感细胞类型
NucView® 488 Caspase-3 底物，1 mM DMSO	10402	绿色荧光底物在 100 多种细胞类型和 200 篇出版物中得到验证
NucView® 488 Caspase-3 底物，1 mM PBS 溶液	10403	PBS 中的 NucView® 488 底物，用于 DMSO 敏感细胞类型
NucView® 530 Caspase-3 底物，1 mM DMSO	10406	在 Cy®3 通道中用于显微镜检查或在 R-PE 通道中用于流式细胞术的橙色荧光
NucView® 530 Caspase-3 底物，1 mM PBS 溶液	10408	PBS 中的 NucView® 530 底物，适用于 DMSO 敏感细胞类型
NucView® 488 和 MitoView™ 633 细胞凋亡检测试剂盒	30062	用于 Cy®5 通道的 NucView® 488 和远红荧光 MitoView™ 633
NucView® 488 和 RedDot™ 2 细胞凋亡和坏死试剂盒	30072	用于 Cy®5 通道的 NucView® 488 和远红死细胞 DNA 染料 RedDot™ 2
使用 NucView® 488 和 CF®594 Annexin V 进行双重细胞凋亡检测	30067	NucView® 488 和红色荧光 Annexin V 细胞凋亡探针
使用 NucView® 488 和 CF®640R Annexin V 进行双重细胞凋亡检测	30073	NucView® 488 和远红荧光膜联蛋白 V 细胞凋亡探针

从蓝色、绿色或橙色荧光中选择

NucView® 488

NucView® 488 Caspase-3 Substrate 用绿色荧光染色凋亡细胞核，用于荧光显微镜或流式细胞术中 FITC 通道中的检测。染料被 488 nm 激光线激发。NucView® 488 可用于使用蓝色和远红色荧光探针进行多色成像。NucView® 488 是最初的 NucView® 探针，已在 200 多篇出版物和 100 多种细胞类型中得到验证。

NucView® 405

NucView® 405 Caspase-3 Substrate 用蓝色荧光染色凋亡细胞核，用于在 DAPI 通道中通过共聚焦显微镜或通过 Pacific Blue® 通道中的流式细胞术进行检测。染料被 405 nm 激光线激发。NucView® 405 是希望为其他检测试剂保留绿色荧光通道的研究人员在多色应用中检测 caspase-3 的理想选择。

注意：使用落射荧光显微镜可能难以观察到 NucView® 405 信号。建议使用 405 nm 激光激发的共聚焦显微镜进行成像。

NucView® 530

NucView® 530 Caspase-3 Substrate 用橙色荧光染色凋亡细胞核，用于通过荧光显微镜在 Cy®3 通道中检测，或通过流式细胞术在 PE 通道中检测。染料被 488 nm 激光线激发。NucView® 530 可用于使用蓝色、绿色或远红色荧光探针进行多色成像。

注意：当被 488 nm 激光线激发时，NucView® 530 也会在 FITC 通道中发出荧光，因此不能与绿色探针一起通过流式细胞仪进行分析。

NucView 是 Biotium 的注册商标。NucView 酶底物技术受美国专利保护。

产品属性

固定选项：染色后固定（甲醛），染色后透化

储藏条件：储存于 2 至 8 °C，储存于 -10 至 -35 °C

Excitation/Emission： 429/469 nm（含 DNA）、500/530 nm（含 DNA）、528/563 nm（含 DNA）

细胞凋亡/活力标记：蛋白酶

对于活细胞或固定细胞：对于活细胞/完整细胞

检测方法/读数：荧光显微镜、活细胞成像、流式细胞仪

检测类型/选项：终点分析、均相分析、长期染色（24-72 小时）、免洗染色、实时成像

底物特异性：蛋白酶

颜色：蓝色、绿色、橙色

常见问题

我们的大多数产品在室温下可稳定保存数日，因此产品很可能仍能正常工作。为了安全起见，我们建议在处理大量样品或珍贵样品之前，先进行小规模的阳性对照实验，以确认该产品仍然适用于您的应用。

我们知道的一个例外是 GelGreen™，它比我们大多数其他荧光染料对光照更敏感。如果 GelGreen™ 长时间（数天至数周）暴露在环境光下，其颜色将从深橙色变为砖红色。如果发生这种情况，GelGreen 将不再适用于凝胶染色。

生物科学试剂盒
产品信息表上列出了自收到生物科学试剂盒之日起保证的保质期。一些套件在套件盒标签上印有有效期，这是从产品从我们工厂发货之日算起的保证保质期。套件的功能通常比保证的保质期长得多。如果您希望使用存储中的旧试剂盒，我们建议在处理大量样品或珍贵样品之前进行小规模阳性对照实验以确认该试剂盒仍适用于您的应用。

抗体和其他偶联物
产品信息表上列出了抗体和偶联物自收货之日起的保证保质期。抗体和其他结合物的功能通常比保证的保质期长得多。如果您希望使用存储中的旧偶联物，我们建议在处理大量样品或珍贵样品之前进行小规模阳性对照实验以确认该产品仍适用于您的应用。

对于冻干抗体，我们建议用甘油和抗菌防腐剂（如叠氮化钠）重构抗体以获得最长的保质期（请注意，叠氮化钠与 HRP 偶联物不相容）。

化学品、染料和凝胶染色剂
Biotium 保证化学品、染料和凝胶染色剂在您收到产品之日起至少一年内保持稳定。然而，只要按照建议储存，这些产品中的大多数在多年内都非常稳定。存储条件可在产品信息表或产品安全和数据表、材料安全数据表以及产品标签上找到。荧光化合物应避光以便长期储存。

如果您希望使用已储存超过一年的 Biotium 化合物，我们建议您进行小规模阳性对照实验，以确认该化合物在处理大量样品或珍贵样品之前仍适用于您的应用样品。

基于生产日期的有效期 (DOM)
如果您的机构要求您记录基于试剂生产日期的有效期，请联系 techsupport@biotium.com 寻求帮助。

有特殊稳定性考虑的化工产品：

酯类

酯类化合物包括：
• 琥珀酰亚胺酯（SE，也称为 NHS 酯），例如我们的胺反应性染料
• 乙酰氧基甲基酯（AM 酯），例如我们的膜渗透性离子指示剂染料
• 二乙酸酯改性染料，例如 ViaFluor ™ 405、CFDA 和 CFDA-SE 细胞活力/细胞增殖染料

只要避光和防潮，酯类染料在固体形式下是稳定的。酯在水溶液中不稳定。应在无水 DMSO中制备浓缩储备液（参见 Biotium 目录号90082）。无水 DMSO 中的储备液可在 -20°C 下干燥保存一个月或更长时间。酯类应在使用前立即用水溶液稀释。琥珀酰亚胺酯 (SE) 应溶解在不含会与 SE 官能团反应的含胺化合物（如 Tris、甘氨酸或蛋白质）的溶液中。AM 酯和二乙酸化合物应溶解在不含血清的溶液中，因为血清可能含有会水解该化合物的酯酶。

关于 CF® 染料琥珀酰亚胺酯稳定性的说明

琥珀酰亚胺酯 (SE) 通常容易水解，从而导致标记效率降低。许多用于生命科学研究的市售荧光染料都是高度磺化的染料，这使得它们特别容易吸湿，从而加剧了水解问题。此外，对于几种市售的 SE 活性染料，SE 基团衍生自芳香族羧酸，而 Biotium 的所有 CF® 染料中的 SE 基团均由脂肪族羧酸制备。这种结构差异降低了 CF® Dye SE 反应基团对水解的敏感性，从而产生相对稳定的活性染料，与其他荧光染料的其他 SE 衍生物相比，标记效率始终更高。

马来酰亚胺、MTS 和硫代硫酸盐染料
与琥珀酰亚胺酯染料一样，这些染料也容易水解，尽管水解程度通常要低得多。因此，对于长期储存，建议使用无水 DMSO 制备储备液。

其他活性染料
胺类、氨氧基（也称为甲醛）、酰肼、叠氮化物、炔烃、BCN 和酪胺类活性染料，以及染料游离酸，在-20°C 下储存 6-12 年时通常在水溶液中稳定几个月或更长时间，只要不存在可能与染料的官能团发生反应的化合物。有关特定活性染料的更多信息，请参阅产品信息表。

腔肠素和 D-荧光素

按照建议储存时，腔肠素以固体形式稳定；它们在水溶液中不稳定。应在乙醇或甲醇中制备浓缩腔肠素储备液（通常为 1-100 mg/mL）；不要使用 DMSO 或 DMF 溶解腔肠素，因为这些溶剂会氧化化合物。腔肠素的乙醇或甲醇库存可在 -20°C 或以下储存六个月或更长时间；酒精储备在储存过程中可能会蒸发，因此请使用密封的螺旋盖小瓶并用封口膜包裹小瓶以进行长期储存。丙二醇也可用作溶剂以减少蒸发。如果溶剂蒸发，腔肠素仍会存在于小瓶中，因此在储存前记下小瓶中的体积，以便您可以根据需要调整溶剂体积以校正蒸发。使用前立即在水性缓冲液中制备工作溶液。腔肠素在水溶液中最多可稳定 5 小时。

Aquaphile™ 腔肠素是腔肠素的水溶性制剂。当按照建议储存时，它们以固体形式稳定。Aquaphile™ 腔肠素应在使用前立即溶解在水溶液中。它们在水溶液中最多可稳定 5 小时。

请注意，腔肠素主要是黄色固体，但可能含有深红色或棕色斑点。这不会影响产品稳定性或性能。如果您的腔肠素呈均匀的棕色，则说明它已被氧化，需要更换。

D-荧光素在固体形式下是稳定的，并且在按照建议储存时作为浓缩储备液；它在水溶液中的稀释工作浓度下不稳定。在水中制备浓缩的 D-荧光素储备溶液（通常为 1-100 mg/mL），并在 -20°C 或更低温度下分装储存六个月或更长时间。使用前立即准备工作解决方案。