PAGE GelRed® Nucleic Acid Gel Stain
PAGE GelRed® 是一种超灵敏、极其稳定且对环境安全的荧光核酸染料,专门设计用于染色聚丙烯酰胺凝胶中的 DNA。
在聚丙烯酰胺凝胶中进行出色的 dsDNA 染色
配方可有效渗透聚丙烯酰胺凝胶
比 EtBr 更安全:无诱变性且无危险处置
简单的电泳前后凝胶染色,无需脱色
与标准 EtBr 成像设备或光学设置一起使用
与下游凝胶纯化、限制性消化、测序和克隆兼容
PAGE GelRed® 是一种无毒、无诱变性的红色 DNA 凝胶染色剂,专门设计用于染色聚丙烯酰胺凝胶中的 DNA。它可以使用带有溴化乙锭滤光片的 254 nm 紫外透照仪成像,并且可以使用常用的凝胶提取试剂盒从 DNA 凝胶染色中去除。PAGE GelRed® 对 dsDNA 的敏感度是 RNA 的 6-8 倍。PAGE GelRed® 提供 10,000X 和 1X 浓度。只有高度浓缩的 10,000X 水溶液才能用于预铸。虽然两种浓度的 PAGE GelRed® 均可用作电泳后凝胶染色剂,但 1x PAGE GelRed® 以 4L Cubitainer® 的形式提供,作为一种方便且易于分配的即用型后染色剂。
PAGE GelRed®:聚丙烯酰胺凝胶的优质染料
最初的GelRed®和GelGreen®染料,染料的膜不透性主要是通过使染料物理变大来实现的。虽然这种策略在提高染料的安全性方面非常有效,但相对较大的 GelRed® 和 GelGreen® 尺寸使染料难以渗透到更密集的聚丙烯酰胺凝胶中,从而使染料不太适合 PAGE 凝胶染色。
在设计 PAGE GelRed® 时,我们使用了一种新颖的方法来使染料膜不透水,而无需使染料变大。因此,PAGE GelRed 很容易对密集堆积的聚丙烯酰胺凝胶中的 dsDNA 进行染色。重要的是,该染料仍然具有 Original GelRed® 众所周知的优点;安全性、灵敏度、稳定性以及与现有仪器和下游样品分析的兼容性。另请参阅我们的 GelRed® 和 GelGreen®常见问题 (FAQ)。
无诱变性,对环境更安全
一系列安全测试已证实 PAGE GelRed® 在浓度远高于凝胶染色中使用的工作浓度时无细胞毒性、无诱变性和无害性。因此,工作强度 PAGE GelRed® 可以安全地丢弃到下水道或普通垃圾中,从而提供便利并降低废物处理成本。如需详细的测试结果,您可以下载PAGE GelRed® 安全报告。
您的凝胶染料有多安全?
许多所谓的“安全”DNA 染料,如 SYBR® Safe、Midori Green、GreenSafe、SafeView™ 和 RedSafe™,不仅灵敏度低,而且很容易穿透活细胞结合 DNA,有些还具有细胞毒性。与这些染料不同,GelRed® 是细胞膜不可渗透的,因此它不能进入活细胞与它们的 DNA 相互作用。 有关详细信息,请参阅我们的 凝胶染色比较传单 或 凝胶染色比较白皮书。
为您的应用选择合适的染色剂
PAGE GelRed® 核酸凝胶染料是推荐用于在聚丙烯酰胺凝胶中染色 DNA 的染料。虽然 PAGE GelRed® 可用于在琼脂糖凝胶中对 DNA 进行染色,但其灵敏度不如 Original GelRed®。对于预制凝胶染色,只能使用高度浓缩的染料溶液(10,000X 水溶液),方法是将染料直接添加到熔化的琼脂糖中。虽然两种浓度的 PAGE GelRed® 均可用作电泳后凝胶染色剂,但 1X PAGE GelRed® 装在 4L Cubitainer® 中,作为一种方便且易于分配的即用型后染色剂。
对于琼脂糖凝胶,我们推荐使用Original GelRed® Nucleic Acid Gel Stain或GelGreen® Nucleic Acid Gel Stain。虽然 PAGE GelRed® 可用于琼脂糖凝胶中的 DNA 染色,但它的灵敏度不如 Original GelRed®。GelRed® 3X 水溶液可随时用于电泳后凝胶染色,并装在 4L Cubitainer® 中。更高浓度的 Original GelRed® 可在水中或 DMSO 中以 10,000X 的形式提供。水中的 GelRed® 是一种更新、更安全的配方,也是我们推荐的形式。我们继续为不想改变协议的老用户提供 DMSO 中的 GelRed®。我们还提供GelRed® Agarose 和 GelRed® Prestain Plus 6X Loading Dye. GelGreen® 核酸凝胶染料是 SYBR® 凝胶染料的更安全替代品,与可见光激发兼容。如需更多信息,请查看我们的 DNA 凝胶染色技术页面。
产品/方法 | 程序 | 优点 | 缺点 | 推荐给 |
---|---|---|---|---|
使用GelRed® Prestain Plus 6X DNA Loading Dye进行 DNA 预染色 | GelRed® 加载缓冲液在加载前直接添加到 DNA 样本中 | • 快速简单:一步上样和 DNA 染色 • 染料浓度较低,操作更安全 • 可以重新运行凝胶以使用空泳道 | • 不推荐用于 PAGE、DGGE、EMSA 或 PFGE 凝胶 • 上样大量 DNA(超过 ~100 ng/条带)或某些限制性消化时,染料可能会导致条带迁移问题 | • 常规琼脂糖凝胶 • 建议加载 50-200 ng ladder 或 2-5 uL PCR 产物(~100 ng/条带或更少) |
使用GelRed® 10,000X 水溶液或GelGreen® 10,000X 水溶液进行预制染色 | GelRed® 或 GelGreen® 在凝胶浇铸前与熔化的琼脂糖混合 | 熟悉的协议,快速的结果 | ||
使用GelRed® Agarose LE或GelGreen® Agarose LE进行预制染色 | 提供的琼脂糖预涂有 GelRed® 或 GelGreen®,只需溶解、加热和倾倒 | 更安全更方便,无需处理浓缩染料 | ||
使用GelRed® 10,000X 水中或GelGreen® 10,000X 水中 - 或 - GelRed® 3X 水中进行电泳后染色 | 凝胶中不添加荧光染料,电泳后在 3X GelRed® 或 3X GelGreen® 溶液中染色 | • 最准确的大小/最清晰的条带 • 染色溶液可重复使用 • 通过添加 NaCl 提高灵敏度 | 电泳后额外的染色步骤(最多 30 分钟)(一些客户报告说如果染料不重复使用,仅 5 分钟后结果良好) | • 高度准确的条带大小 • 凝胶中每条带含有超过 ~100 ng DNA • 分析限制性酶切 |
使用PAGE GelRed® 10,000X 或 1X 水溶液对 PAGE 凝胶进行电泳后染色 | 凝胶中不添加荧光染料,电泳后在1X PAGE GelRed®溶液中染色 | • 专为聚丙烯酰胺凝胶的高效渗透和染色而设计 • 与经典的 GelRed® 一样,安全且环保 | 大约额外的染色步骤。电泳后30分钟 | PAGE 凝胶中的核酸染色 |
GelRed® 及其用途受已授予和/或正在申请的美国和国际专利保护。GelRed 和 EvaGreen 是 Biotium, Inc. 的注册商标。SafeView 是 Applied Biological Materials 的商标;RedSafe 是 iNtRON Biotechnology 的商标。SYBR 是 Thermo Fisher Scientific 的注册商标。Cubitainer 是 Hedwin Corporation 的注册商标。
参考
Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol, 311, L352, (2016), DOI: 10.1152/ajplung.00156.2014
PloS one 11, 9 (2016), DOI: 10.1371/journal.pone.0162082
BBA - 生物能学 1847, 587 (2015), DOI: 10.1016/j.bbabio.2015.03.007
书籍:非编码 RNA,IntechOpen (2019),DOI:10.5772/intechopen.88064
核酸 Res 48(15), e87 (2020), DOI: 10.1093/nar/gkaa516